МЕТОДИКА ОТБОРА ПРОБ МЕДОНОСНЫХ ПЧЕЛ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРОДНОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

В настоящее время существует несколько методов определения породной принадлежности медоносных пчел:

-фенотипический,

-морфологический

-ПЦР-анализ.

Фенотипическая оценка медоносных пчел проводится при непосредственном осмотре живых особей, в отобранных (законсервированных) пробах можно оценить наличие желтизны на тергитах.

Для определения породной принадлежности медоносных пчел по морфологическим признакам и генетическому происхождению (методом ПЦР-анализа) пробы пчел отбирают в конце пчеловодного сезона (как правило, в августе) следующими способами:

• С сота с запечатанным расплодом сметают в стеклянную емкость с кипятком 30-50 молодых пчел, через 2-3 секунды высыпают на марлю (10 × 15 см). Марлю с пчелами завязывают и помещают в емкость с 70%-ным спиртом, каждую пробу подписывают карандашом, таким образом в одной емкости хранят несколько проб.

• С сота с запечатанным расплодом пинцетом или с помощью эксгаустера (всасывающего устройства) отбирают по 30-50 пчел, которых помещают в небольшую емкость, где пчел усыпляют парами серного эфира. Затем пчел помещают в емкость с 70%-ным спиртом.

• С сота с запечатанным расплодом сметают в стеклянную емкость с 70%-ным спиртом 30-50 пчел. Для ПЦР-анализа данный способ отбора и хранения проб обязателен, с последующим хранением проб при температуре не выше минус 18°С.

Все отобранные пробы пчел подписываются, где указываются: место расположения пасеки, номер пчелиной семьи и дата отбора пробы, Ф.И.О. владельца пасеки или название хозяйства.

Для определения породной принадлежности по морфологическим (экстерьерным) признакам анализируют не менее 30 особей от одной пчелиной семьи. Данное количество особей в пробе, с учетом размаха естественной изменчивости экстерьерных признаков у медоносных пчел, позволяет рассчитать критерий статистической достоверности различий, наблюдаемых между отдельными семьями.

Препарирование частей тела медоносных пчел производится в лаборатории при нормальном освещении, начиная с правого переднего крыла, которое отрезают глазными ножницами или отрывают пинцетом у основания, т.е. у самой груди. Затем отрывают голову пчелы от груди и отделяют от нее ротовой аппарат с помощью препаровальной иглы, предварительно уложив голову затылочной стороной кверху. После этого от груди отчленяют брюшко, и с помощью пинцета или препаровальной иглы вычленяют третий спереди (от груди) тергит (верхнее брюшное полукольцо) и третий спереди стернит (нижнее брюшное полукольцо). Затем препарируют первый членик лапки правой задней ножки от каждой пчелы. Отпрепарированные части тела медоносной пчелы укладывают параллельно друг другу на увлажненное глицерином предметное стекло, которое накрывают сверху тонкими покровным стеклом, или размещают на листе белой бумаги, где препараты фиксируют прозрачным скотчем. Каждая отпрепарированная проба подписывается с указанием места расположения пасеки, номера пчелиной семьи и даты отбора пробы.

Измерение морфометрических признаков медоносных пчел проводится под бинокулярным микроскопом МБС-10 (или аналогах) с помощью линейки окуляр-микрометра или оборудованным видеокамерой например, DCM 300. При этом длина крыла измеряется при увеличении ×10, а размеры всех остальных частей хитинового скелета – ×20.